Джон Полито учился в Университете Виллановы. Начинал актёрскую карьеру в 1977 году на Бродвее, в кино пришёл в 1981 году. Свою дебютную роль капитана Сполдинга сыграл в 2003 году в фильме "Das Haus der Leichen 1000". За свой успех он благодарен своему наставнику Доминику Герви, единственному действующему преподавателю Ирэне Бэрд и великому режиссеру и другу Паулу Беттис.
В фильмах и телесериалах играет, в основном, полицейских или преступников. Снялся в первых двух сезонах сериала «Убойный отдел», был уволен за разногласия с продюсером Томом Фонтаной. Наиболее известен по 5 фильмам братьев Коэнов. Джон Полито является открытым геем.
Витрина DC: Супермен/Шазам! – Возвращение черного Адама
Оригинальная коллекция короткометражек витрины DC
Телеканал «Гори в Аду»
Суперпридурки
Оранжевый мишка
Приключения Рокки и Буллвинкля
Дорогая, я уменьшил детей
Дорога домой 2: Затерянные в Сан-Франциско
Ремо Уильямс: Приключение начинается
Принцесса и девушка по вызову
Гангстерские хроники